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Sviluppo di un nuovo test a flusso laterale (Lateral Flow Assay) per la rilevazione della peste suina africana (PSA) nel sangue

La continua propagazione della peste suina africana (PSA) suppone una grave minaccia per il settore suinicolo a livello mondiale. In assenza del vaccino, la rilevazione precoce dei soggetti infettati è di somma importanza per il controllo dei focolai, prevenendo la trasmissione del virus ad animali sani e la successiva propagazione della malattia. La diagnostica di laboratorio si basa principalmente su metodi virologici (rilevazione dell'antigene e del genoma) e la diagnostica sierologica....Il presente studio ha sviluppato e valutato un test a flusso laterale (LFA-Lateral Flow Assay) per la rilevazione degli antigeni....

18 Ottobre 2016
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La continua propagazione della peste suina africana (PSA) suppone una grave minaccia per il settore suinicolo a livello mondiale. In assenza del vaccino, la rilevazione precoce dei soggetti infettati è di somma importanza per il controllo dei focolai, prevenendo la trasmissione del virus ad animali sani e la successiva propagazione della malattia. La diagnostica di laboratorio si basa principalmente su metodi virologici (rilevazione dell'antigene e del genoma) e sulla diagnostica sierologica.

Il presente studio ha sviluppato e valutato un test a flusso laterale (LFA-Lateral Flow Assay) per la rilevazione degli antigeni. La prova si basa sull'uso di un MAb contro la proteina VP72 del virus della PSA, la principale proteina del capside virale ed altamente immunogenica. I primi esperimenti usando la proteina virale e ricombinante VP72 o coltivazione del virus inattivato, hanno mostrato risultati promettenti con una sensibilità similare a quella di un antigene-ELISA disponibile sul mercato. Inoltre, queste strisce sono state testate con il sangue di suini infettati sperimentalmente e di suini di campo ed i risultati vennero confrontati con quelli della PCR ed Antigene-ELISA.

Per i campioni infettati sperimentalmente, ci fu una eccellente correlazione tra LFA e l'ELISA, mentre la PCR si mostrò più sensibile (38% di campioni positivi da PCR a fronte del 27% con LFA). LFA si mostró positivo per i soggetti con livelli circolanti di virus al di sopra di 104 unità di emoagglutinazione. Con i campioni di campo, una volta in più, la PCR rilevò più positivi che l'ELISA o LFA, anche se in questo caso il numero di campioni positivi per LFA superó i valori ottenuti con l'antigene-ELISA, mostrando un 60% di positività a fronte del 48% per l'ELISA. Per i due gruppi di siero, la specificità fu vicina al 100%, il che indica che difficilmente si trovarono dei falsi campioni positivi.

Il nuovo LFA sviluppato permette il rilevamento veloce ed affidabile del virus della PSA a livello di campo e di laboratorio, fornendo un nuovo strumento utile per programmi di controllo ed in situazioni dove l'appoggio tanto dei laboratori come del personale qualificato sono limitati.

C. Gallardo, A. Monedero, T. Ruiz, M. Arias, A. Sanz and P. Rueda. Development of a novel lateral flow assay for detection of African swine fever in blood. BMC Veterinary Research. September 2016. DOI: 10.1186/s12917-016-0831-4

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