Come monitorare efficacemente la circolazione del PRRSV in allevamento?

Monitoraggio in sala parto

Per determinare se un'allevamento è stabile nei confronti del PRRSV, è necessario confermare che non nascono suinetti viremici. La trasmissione transplacentare del PRRSV è altamente efficiente, in particolare alla fine della gestazione, e quindi, se vi è viremia nelle scrofe, molto probabilmente si verificherà un'infezione dei feti in utero.

Per questo dobbiamo monitorare le sale parto. Idealmente, i suinetti dovrebbero essere testati alla nascita, ma a causa della difficoltà nel campionare questi soggetti, i suinetti vengono spesso campionati poco prima dello svezzamento. Se i risultati sono negativi, confermano l'assenza di circolazione del virus nelle scrofe. Se sono positivi, dobbiamo prelevare campioni alla nascita per determinare se i suinetti sono nati infetti o sono stati infettati da contaminazione crociata durante la lattazione.

Il campione di riferimento per determinare la presenza del virus è il siero. Inizialmente, i campioni di sangue dovrebbero essere prelevati da un totale di 30 suinetti, che ci permetterebbero di rilevare una prevalenza del 10% con un livello di confidenza del 95% in campioni casuali. Quando si campionano animali con segni di malattia, si stima che la sensibilità sia maggiore. In situazioni di circolazione virale molto bassa, come le fasi finali di un programma di stabilizzazione o allevamenti considerati clinicamente stabili, questa intensità di campionamento potrebbe non essere sufficiente e si raccomanda di aumentare la dimensione del campione a 60, che consente di rilevare prevalenze del 5% o superiori. A causa del basso livello di circolazione virale, il campionamento sistematico e seriale deve essere effettuato per lunghi periodi di tempo, poiché è possibile che dopo alcuni mesi di risultati negativi possiamo trovare alcuni campioni positivi. I suinetti di almeno un ciclo riproduttivo completo devono essere monitorati quando iniziamo a trovare risultati negativi.

Data la difficoltà di prelevare campioni di sangue da soggetti giovani, l'impatto sul loro benessere e le grandi dimensioni del campione necessarie per rilevare tali basse prevalenze, sono stati sviluppati sistemi di campionamento alternativi. Una opzione è l'uso di emosieri, corrispondenti all'essudato dai testicoli e dalle code. Poiché questo essudato è composto principalmente da plasma e sangue, il virus si trova di solito quando i suinetti sono viremici, quindi è una buona opzione per aumentare le dimensioni del campione, mantenendo una buona sensibilità rispetto all'analisi dei campioni di siero. Bisogna tener presente che l'uso di emosieri è valido solo negli allevamenti in cui viene praticata la castrazione sistematica. Negli emosieri provenienti solo da code tagliate, la sensibilità è molto più bassa e insufficiente per determinare in modo affidabile lo status dell'allevamento (Vilalta et al., 2018).

L'ottenimento di sangue proveniente dai cordoni ombelicali ha dimostrato di essere un'opzione praticabile per il rilevamento del PRRSV nei suinetti neonati (Martin-Valls et al., 2018). Sebbene il campione sia più facile da ottenere, deve essere raccolto intorno al momento della nascita e deve essere tenuto conto del fatto che è possibile rilevare la contaminazione ambientale. Tuttavia, è un'alternativa affidabile che consente di monitorare facilmente la sala parto ed è preferibile agli emosieri della sola coda.

I fluidi orali sono stati inoltre identificati come campioni validi. Il problema in questo caso è che i suinetti sottoscrofa di solito non sono attratti dalle corde, quindi il tempo di campionamento è lungo e la rappresentatività della figliata bassa, il che li rende un'opzione non praticabile. Per cercare di migliorare l'utilità della tecnica, abbiamo scelto di includere la madre nei cosiddetti fluidi familiari, poiché l'esempio della madre incoraggia i suinetti a mordere la corda e aumenta la sensibilità della tecnica. Tuttavia, è un sistema in fase di studio e non è considerata l'opzione migliore. Inoltre, è stata descritta la possibilità di prelevare campioni dalle superfici delle mammelle delle scrofe usando salviette imbevute di liquidi con il ragionamento che, se i suinetti sono infetti, espellono il virus nei fluidi orali e contaminano la mammella. Sebbene ci siano poche esperienze ed è presto per valutare il valore di questo sistema, i risultati sono incoraggianti, così come quelli ottenuti con campionamenti delle superfici delle sale parto.

In questo caso, tuttavia, proprio come abbiamo indicato per i cordoni ombelicali, è possibile ottenere campioni positivi da figliate negative, il che indica il rilevamento di RNA virale da contaminazione ambientale, quindi l'interpretazione dei risultati deve essere attenta (Vilalta et al, 2019).

Infine, si sta studiando la possibilità di utilizzare la raccolta di campioni aggregati da parti delle carcasse, in particolare le lingue, per determinare la presenza o l'assenza del virus nei suinetti nati morti (Baliellas, 2020).

Monitoraggio dei riproduttori

Un altro punto chiave è l'analisi delle scrofe da rimonta. Ciò dovrebbe includere un campione all'ingresso e un altro all'uscita dalla quarantena utilizzando ELISA e RT-PCR per confermare il loro stato sanitario, monitorare l'efficienza dell'adattamento e conoscere il momento dell'infezione, se si verifica. Strumenti come il sequenziamento dovrebbero essere utilizzati per confermare l'identità dei virus rilevati durante il periodo di adattamento (ovvero vaccino o ceppo di campo). Sebbene non sia sufficiente confermare che le scrofe non rappresentano un rischio per l'allevamento, dobbiamo verificare che, almeno, non siano viremiche quando entrano nelle strutture di gestazione.

D'altra parte, il monitoraggio dei riproduttori è estremamente difficile. La sierologia è di scarso valore poiché non ci sono vaccini etichettati sul mercato, i valori di S / P sono molto variabili tra gli individui e a loro volta dipendenti dal ceppo che causa l'infezione (Kim et al., 2007) e gli animali rimangono sieropositivi per molti mesi. Inoltre, spesso non c'è risposta secondaria dopo la reinfezione e, quando si verifica, è molto rapida, quindi il campionamento associato è spesso di scarsa utilità nel determinare il ricircolo del virus. Allo stesso modo, il monitoraggio mediante RT-PCR non è pratico, poiché il numero di animali viremici in un determinato momento è molto basso e la viremia negli animali adulti e con immunità precedente è molto breve. Tutto ciò significa che, in pratica, la capacità di rilevamento è molto bassa e non ne vale la pena. Sulla base di tutto quanto precedentemente commentato, possiamo concludere che Il monitoraggio delle scrofe in produzione è utile solo negli allevamenti negativi e per la diagnosi di focolai della malattia.

Al contrario, il monitoraggio dei suini in accrescimento è abbastanza facile e si può usare quasi ogni campione e tecnica. L'unica considerazione sarebbe quella di utilizzare una dimensione del campione e un sistema di campionamento che consenta di ottenere una buona rappresentatività della popolazione studiata in base al livello atteso di prevalenza.