Dinamica dell'infezione da Mycoplasma hyorhinis in allevamenti suinicoli commerciali

Durante gli ultimi anni è aumentato l'interesse verso il Mycoplasma hyorhinis come causa di polisierositi ed artriti in suinetti svezzati. Si ipotizza che le scrofe trasmettano l'agente ai propri suinetti, tuttavia la conoscenza dell'epidemiologia e dell'ecologia dell'agente è limitata. Attualmente esiste poca informazione rispetto importanti aspetti della malattia come: colonizzazione, dinamica della trasmissione post-svezzamento ed il ruolo della scrofa.

Negli studi che seguono sono state utilizzate come prove diagnostiche la qPCR, e come tecniche di raccolta dei campioni i fluidi orali ed i tamponi nasali, per ampliare le conoscenze epidemiologiche del patogeno nella suinicoltura di oggi.

Studio 1. Stima della prevalenza della colonizzazione nasale da M. hyorhinis in allevamenti di suini con polisierositi

Sono stati selezionati 3 allevamenti con 6000 scrofe assegnate agli allevamenti A, B e C, ed i rispettivi suinetti svezzati. Nonostante gli allevamenti avessero storicamente avuto malattia da M. hyorhinis, solamente gli allevamenti A e B presentarono un'elevata mortalità dovuta a polisierositi al momento del campionamento. Per ogni allevamento il campionamento è stato fatto con la raccolta di tamponi nasali di 60 scrofe e 60 suinetti di ogni gruppo di età (1, 7, 14 e 21 giorni di vita),così come 30 suini più vecchi con 28, 35, 42, 49, 56, 63, 70 e 77 giorni di età. Inoltre, considerando che il M. hyorhinis può essere presente sulla superficie orofaringea, sono stati prelevati campioni di fluidi orali di un box per ogni fascia di età in fase di svezzamento. Per indagare sul ruolo del M. hyorhinis nei casi di polisierositi, sono stati fatti campioni di tessuto di 10 animali clinicamente colpiti e di 10 animali sani attraverso il sacrificio e necroscopia di animali in età corrispondente al picco della mortalità. I campioni sono stati testati per il M. hyorhinis mediante una qPCR sviluppata nel nostro laboratorio.

Risultati dello studio

Abbiamo osservato la presenza di M. hyorhinis nella cavità orale di 5/60 scrofe nell'Allevamento A, e in 3/60 scrofe nell'Allevamento B e nessuna scrofa nell'Allevamento C. Negli allevamenti A e B, dove erano presenti casi clinici di M. hyorhinis, la prevalenza della colonizzazione fu bassa nei suinetti lattanti (media dell' 8%) ed elevata in fase di svezzamento (media del 98%). Al contrario, nell'Allevamento C, senza casi clinici di M. hyorhinis, la colonizzazione fu molto bassa fino alla fine della fase di svezzamento. Rispetto ai fluidi orali, 7/8 dei campioni raccolti dei suini post-svezzamento erano positivi al M. hyorhinis negli allevamenti A e B, mentre solamente 1/8 era positivo per l'Allevamento C. Non sono stati osservati casi di polisierositi in nessun animale sano clinicamente dei 3 allevamenti, nemmeno nei suini ammalati dell'Allevamento C. Indubbiamente, negli allevamenti A e B furono osservate polisierositi in 9/10 e 4/10 dei suini malati, rispettivamente (Figura 1). M. hyorhinis fu identificato attraverso PCR nel pericardio di 8/10 suini malati in A e 3/10 in B. Si è potuto isolare il M. hyorhinis dal pericardio nei campioni degli allevamenti A e B. Nell'Allevamento C, la PCR non ha rilevato M. hyorhinis da nessuno dei suini sacrificati.

Figura 1. Pericarditi osservate in un caso di malattia sistemica dovuta a M. hyorhinis.

Studio 2. Studio longitudinale prospettivo della colonizzazione da parte di M. hyorhinis in allevamenti commerciali

Sono stati selezionati 2 allevamenti da multiplicazione (A e B) con uno storico di polisierositi e non vaccinati per M. hyorhinis. In ogni allevamento è stato realizzato un campionamento longitudinale a differenti età. Si presero un totale di 50 scrofette di primo e secondo parto e 50 scrofe di terzo parto ed altre a cui sono stati prelevati tamponi nasali per l'identificazione di M. hyorhinis attraverso qPCR ed anticorpi nel sangue mediante ELISA (Figura 2).

Figura 2. Raccolta di tamponi nasali di scrofe per l'identificazione di M. hyorhinis con qPCR.

E' stato selezionato a caso, anche un suinetto per figliata, 100 in totale, che furono identificati con marca auricolare. Sono stati raccolti tamponi nasali e sangue di ogni suinetto alla nascita e a 10 giorni post-svezzamento (Figura 3-4). Sono stati fatti nuovi campioni in fase di svezzamento ed in fase di ingrasso durante il picco della malattia (polisierositi/artriti/polmoniti). Inoltre durante il campionamento e con l'obiettivo di confermare il ruolo del M. hyorhinis nei casi di polisierositi, un totale di 12 suini sono stati sacrificati e sottoposti a necroscopia (10 animali clinicamente malati e 2 clinicamente sani). Sono stati raccolti un totale di 56 campioni di fluidi orali in fase di svezzamento. Riassumendo: 1.050 tamponi nasali di 216 scrofe e 216 suini, in 10 fascie di età diverse.

Figura 3. Identificazione dei suinetti al campionamento.	Figura 4. Tamponi nasali dei suinetti dopo la nascita.

Risultati dello studio

M. hyorhinis fu isolato attraverso la qPCR nella cavità nasale di 5/107 scrofe nell'Allevamento A e di 2/110 nell'Allevamento B. Quattro delle scrofe positive erano di primo e secondo parto, mentre le altre 3 erano di terzo parto. La prevalenza della colonizzazione dei suinetti fu bassa in entrambi gli allevamenti (media di 1,7%) ed elevata in fase di svezzamento (media dell' 85%). La maggior parte dei suini hanno avuto colonizzazione poco dopo l'entrata in svezzamento e sono rimasti positivi durante tutta la fase di svezzamento ed ingrasso. In entrambi gli allevamenti i risultati dei titoli anticorpali mostrarono che i suini avevano anticorpi (materni) per M. hyorhinis poco dopo la nascita. Questi anticorpi iniziarono a diminuire poco dopo lo svezzamento. A circa 94 e 64 giorni di vita, negli allevamenti A e B, rispettivamente, i titoli anticorpali cominciarono ad aumentare. Si ipotizza che l'aumento fu dovuto ad una risposta immunitaria attiva. Nell'allevamento A, 25/31 fluidi orali furono positivi. L'identificazione nei fluidi orali fu congrua con i risultati dei tamponi nasali. Nell'allevamento A, M. hyorhinis è stato identificato nel pericardio (12/18) e nelle articolazioni (10/18) dei suini malati. Lo stesso per l'Allevamento B, il M. hyorhinis è stato identificato nel pericardio (5/10) e nelle articolazioni (4/10) dei suini malati. Questo contrasta con l'assenza del patogeno negli stessi tessuti degli animali sani. Tutti i suini sacrificati e sottoposti a necroscopia erano positivi alla PCR per M. hyorhinis nella cavità nasale.

Considerazioni finali

M. hyorhinis si trova in modo abituale nella cavità nasale della specie suina. Senza dubbio, non tutti i suini di una popolazione sono colonizzati e la colonizzazione non avviene allo stesso momento. Si ipotizza che pochi suini colonizzati allo svezzamento siano responsabili della trasmissione post-svezzamento.

L'uso dei fluildi orali per il rilevamento di M. hyorhinis sembra essere un utile strumento per la conoscenza della dinamica dell'infezione di campo e permette una migliore tempistica del trattamento con antibiotici o vaccini. Senza dubbio, sono necessarie ulteriori convalide per l'identificazione del M. hyorhinis nei fluidi orali.

La conoscenza della dinamica dell'infezione negli allevamenti permetterà di stabilire le migliori strategie di controllo negli allevamenti infetti.