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PCV3: identificazione attraverso immunoistochimica in lesioni prodotte da infezione di campo di suinetti

Da quando la circovirosi suina è stata diagnosticata come malattia, molto è cambiato e continua a cambiare: sembra che questo virus in risposta alla pressione vaccinale trova sempre una via di scampo...

Figura 1. (A) Le pareti dei vasi del plesso mesenterico sono interrotte da una marcata infiltrazione di linfociti, istiociti e plasmacellule, oltre alla degenerazione fibrinoide (freccia), HE, Bar. 120 μm. (B) Plesso mesenterico vascolare con colorazione PCV3 nelle cellule infiammatorie e nelle pareti dei vasi che è mostrato in rosso (freccia), l'ematossilina è stata utilizzata come colorante di contrasto per tingere la sezione tissutale per ISH Bar. 120 μm. (C) Plesso mesenterico vascolare con immunomarcatura PCV3 nel citoplasma delle cellule infiammatorie nelle aree perivascolari (punta di freccia) e nel citoplasma e nel nucleo delle cellule della muscolatura liscia delle arterie (freccia), IHQ, AEC, Bar. 120 μm. (D) Polmone con setti alveolari diffusamente dilatati da linfociti e macrofagi (polmonite interstiziale) (freccia), HE, Bar. 120 μm. (E) Polmone con colorazione multifocale di PCV3 nelle cellule infiammatorie nelle aree interstiziali (freccia) e nelle aree perivascolari, che è mostrato in rosso (punta di freccia), ISH, Bar. 120 μm. (F) Polmone con immunomarcatura PCV3 nel citoplasma delle cellule infiammatorie nelle aree perivascolari (punta di freccia) e nel citoplasma e nel nucleo delle cellule della muscolatura liscia delle arterie (freccia), IHQ, AEC, Bar. 120 μm. (G) area di lieve miocardite linfoistiocitica (freccia), HE, Bar. 120 μm. (H) Cardiomiociti con colorazione PCV3 multifocale, mostrata in rosso (freccia), ISH, Bar. 120 μm. (I) Cuore con immunomarcatura PCV3 nel citoplasma delle cellule infiammatorie (punta di freccia) e nel citoplasma dei cardiomiociti (freccia), IHQ, AEC, Bar. 120 μm.
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16 Maggio 2023
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Questo studio mirava a valutare la relazione tra carica virale del circovirus suino di tipo 3 (PCV3) e risultati istopatologici nei tessuti perinatali dei suinetti e sviluppare un metodo immunoistochimico per rilevare il virus nelle lesioni. La soglia quantitativa del ciclo della reazione a catena della polimerasi (qPCR) (Ct) durante l'amplificazione del DNA del PCV3 e l'area degli infiltrati infiammatori perivascolari in diversi organi [sistema nervoso centrale (SNC), polmone, cuore, fegato, milza e linfonodi] sono stati confrontati. Per sviluppare una tecnica di immunoistochimica, sono stati prodotti sieri di coniglio contro peptidi proteici del capside PCV3 selezionati mediante analisi bioinformatiche.

L'esperimento è stato inizialmente implementato utilizzando un campione di tessuto precedentemente testato mediante qPCR e ibridazione in situ per ottimizzare la procedura e le diluizioni dei reagenti.

Per valutare le prestazioni immunoistochimiche, sono stati analizzati campioni di tessuto di altri 17 casi utilizzando parametri standardizzati. La lesione microscopica più comune era la periarterite multisistemica, con vasculite associata, in quanto il plesso vascolare mesenterico è uno degli organi più colpiti. Anche altri tessuti, come il cuore, i polmoni, il sistema nervoso centrale e il muscolo scheletrico, sono stati colpiti. Il confronto dei valori Ct per diversi tessuti non ha mostrato differenze significative, ad eccezione degli organi linfoidi (milza e linfonodi), che avevano cariche virali significativamente più elevate rispetto ai tessuti del SNC.

Non c'era correlazione tra valori Ct e infiltrati infiammatori perivascolari. L'immunoistochimica del PCV3 ha rivelato immunomarcatura granulare, principalmente nel citoplasma delle cellule del plesso mesenterico vascolare, cuore, polmone, rene e milza...

Molossi Franciéli Adriane, Albuquerque de Almeida Bruno, Santana de Cecco Bianca, Pissetti Caroline, Ventura Lauren, Brandalise Luciano, Simão Gustavo, Vanucci Fabio, Negrao Watababe Tatiane Terumi, Vaz Jr. Itabajara da Silva, Driemeier David.Porcine circovirus type 3:immunohistochemical detection in lesions of naturally affected piglets .Frontiers in Veterinary Science v10.2023. URL=https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fvets.2023.1174718DOI=10.3389/fvets.2023.1174718

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