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Test disponibili
Il grafico seguente mostra le variazioni di concentrazione (asse Y) nel tempo (asse X) dei diversi analiti (analytes) utilizzati nei test. Dopo l'esposizione, la viremia inizierà in 1 o 2 giorni e durerà 3-4 settimane. La sieroconversione (rilevamento di anticorpi) di solito si verifica entro 14 giorni dall'esposizione e dura per molti mesi o anni.
Reazione a catena della polimerasi (PCR)
- Rileva la presenza di specifiche sequenze di acido nucleico virale (DNA).
- Tipi di campioni: siero, sangue o tessuti.
- Pro:
- Il metodo più sensibile e preferito per rilevare l'agente.
- Costo moderato:
- I campioni possono spesso essere raggruppati per ridurre i costi e ridurre al minimo la perdita di sensibilità.
- Contro:
- Richiede primers adeguati.
Emoassorbimento (HAT)
- Rileva la presenza del virus attraverso il legame degli eritrociti alla membrana esterna (citoplasmatica) dei macrofagi suini infettati dal virus della PSA.
- Tipi di campioni: siero o plasma.
- Pro:
- Uno dei test di riferimento standard.
- Contro:
- Alcuni ceppi di campo non inducono emoassorbimento e i risultati negativi spesso richiedono la conferma della PCR.
Antigen detection enzyme-linked immunosorbent assay (Ag-ELISA)
- Rileva la presenza dell'agente.
- Tipi di campioni: generalmente sangue ed eventualmente altri tessuti specifici (seguire le raccomandazioni del kit).
- Pro:
- Kits commerciali disponibili.
- Relativamente economico.
- Contro:
- Sensibilità molto inferiore rispetto alla PCR.
- Non è consigliabile raggruppare i campioni.
- I risultati negativi di solito richiedono la conferma mediante PCR.
Antibody detection enzyme-linked immunosorbent assay (Ab-ELISA)
- Rileva la presenza di anticorpi.
Tipi di campioni: siero o plasma. - Pro:
- Gli animali rimangono positivi per diversi mesi o anni.
- Può essere utilizzato in casi cronici.
- Può essere utilizzato in casi di bassa virulenza/subclinici.
- La sieroconversione di solito avviene in 7-10 giorni.
- Attualmente non sono disponibili vaccini commerciali che confondono l'interpretazione dei risultati.
- Contro:
- Ci vogliono 7-10 giorni perché gli animali diventino sieropositivi.
- Non distingue tra anticorpi materni ed esposizione.
Indirect fluorescent antibody (IFA)
- Rileva la presenza di anticorpi.
- Tipi di campioni: siero o plasma.
- Pro:
- Test di conferma su campioni ELISA inaspettatamente positivi.
- Contro:
- Richiede che gli animali siano stati infettati per almeno 1 settimana.
- Non fattibile per un gran numero di campioni.
- I risultati dipendono dal ceppo virale utilizzato nel test.
- L'affidabilità dipende fortemente dall'abilità dei tecnici.
Indirect Immunoperoxidase test (IPT)
- Rileva la presenza di anticorpi.
- Tipi di campioni: siero o plasma.
- Pro:
- Test di conferma su campioni ELISA inaspettatamente positivi.
- Richiede che gli animali siano stati infettati per almeno 1 settimana.
- Non fattibile per un gran numero di campioni.
- I risultati dipendono dal ceppo virale utilizzato nel test.
- L'affidabilità dipende fortemente dall'abilità dei tecnici.
Interpretazione dei risultati:
Spesso sono necessari più test per fornire una migliore interpretazione della diagnosi di PSA.
Tabella 1. Interpretazione dei risultati diagnostici della PSA. Fonte: Laboratorio di riferimento dell'Unione europea per la peste suina africana.
| Test | Risultato | Scenari più probabili |
|---|---|---|
| PCR | Debole (Ct>35) | L'animale è stato infettato di recente e non ha ancora sieroconvertito (<7 giorni). I segni clinici potrebbero non essere evidenti. |
| Ab-ELISA | Negativo | |
| IPT | Negativo | |
| PCR | Positivo | L'animale è stato infettato di recente, presenta segni clinici e sta iniziando la sieroconversione (7-10 giorni). |
| Ab-ELISA | Negativo | |
| IPT | Positivo | |
| PCR | Positivo |
a) Infezione in corso. L'animale rimane viremico con segni clinici ed ha già sieroconvertito (> 10 giorni). b) Reinfezione di un animale con anticorpi preformati da una precedente infezione (suino guarito, sopravvissuto). Il titolo IPT fornirà informazioni sul momento dell'infezione. |
| Ab-ELISA | Positivo | |
| IPT | Positivo | |
| PCR | Debole (Ct>35) o Negativo |
a) Infezione precedente. L'animale si è ripreso da un'infezione acuta o subacuta e potrebbe non mostrare segni clinici. b) L'animale è stato infettato con un ceppo attenuato (con o senza segni clinici). c) Reinfezione di un animale con anticorpi preformati da una precedente infezione (suino guarito, sopravvissuto). Il titolo IPT fornirà informazioni sul momento dell'infezione. |
| Ab-ELISA | Positivo | |
| IPT | Positivo |
PCR
- Positivo: Il virus è presente; infezione in corso.
- Negativo: Negativo o il virus non viene rilevato se il test viene eseguito molto tempo dopo l'infezione.
HAT
- Positivo: Il virus è presente; infezione in corso.
- Negativo: Negativo, infezione con un ceppo non emoassorbente o il virus non si rileva se il test viene effettuato molto tempo dopo l'infezione. Si deve confermare il negativo mediante PCR.
Ag-ELISA
- Positivo: Il virus è presente; infezione in corso.
- Negativo: Negativo, virus presente ma in basse concentrazioni o il virus non viene rilevato se il test viene eseguito molto tempo dopo l'infezione. Negativo deve essere confermato mediante PCR.
Ab-ELISA
- Positivo: Anticorpi materni o precedente esposizione (> 7-10 giorni) a virus di campo.
- Negativo: Negativo o un'infezione da virus di campo troppo recente per essere rilevata.
IFA
- Positivo: Anticorpi materni o precedente esposizione (> 7-10 giorni) a virus di campo.
- Negativo: Negativo o un'infezione da virus di campo troppo recente per essere rilevata.
IPT
- Positivo: Anticorpi materni o precedente esposizione (> 7-10 giorni) a virus di campo.
- Negativo: Negativo o un'infezione da virus di campo troppo recente per essere rilevata.
Scenari
È importante notare che alcuni paesi potrebbero richiedere l'approvazione dell'autorità competente prima di poter eseguire qualsiasi test della PSA.
Sospetto focolaio acuto di PSA in suini di qualsiasi età
- Raccogliere il sangue di vari animali colpiti e analizzarlo mediante PCR; puoi considerare di raggruppare i campioni.
- Raccogliere milze e tonsille da suini morti e analizzarli mediante PCR; puoi considerare di raggruppare i campioni.
Sospetta circolazione cronica di PSA nei suini di qualsiasi età senza mortalità
- Raccogliere il sangue di 30 suini con segni clinici (campionamento mirato) o selezionati casualmente (nessun segno clinico) e analizzarlo mediante PCR (si può considerare il raggruppamento di campioni) e individualmente mediante Ab-ELISA.
