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Sviluppo della tecnica LAMP per rilevare il Toxoplasma gondii nelle carni suine

Il test LAMP (loop-mediated isothermal amplification) proposto in questo studio fornisce un metodo semplice, specifico, sensibile e rapido per rilevare del DNA genomico di T. gondii, per cui si prevede che svolgerà un ruolo importante nel monitoraggio delle contaminazioni da T. gondii nei vari prodotti alimentari.

Martedì 28 Marzo 2017 (2 anni 7 mesi 22 giorni fa)
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Il test di amplificazione isotermica mediata da loop (LAMP-loop-mediated isothermal amplification) è un nuovo metodo che amplifica rapidamente il DNA con una elevata specificità e sensibilità in condizioni di un quadro isotermico.

In questo studio, è stato impostato un test LAMP con sei ingrassatori in una regione con alta presenza di Toxoplasma gondii sequenza ITS-1. Il protocollo di amplificazione si completó in 30 minuti in condizioni isotermiche in un bagno maria a 65 °C e le prove di specificità non confermarono reazioni crociate con modelli di DNA di Neospora caninum, Eimeria tenella, Cryptosporidium parvum, Listeria monocytogenes e Streptococcus suis.

Il limite di rilevamento del test LAMP fu di 0,9 fg di DNA genomico di T. gondii, una sensibilità 10 volte superiore a quella di un test di PCR convenzionale. Tanto il test LAMP che il test PCR convenzionale, vennero applicati per rilevare il DNA genomico del T. gondii in 118 campioni di diaframma ottenuti da allevamenti di suini nella provincia di Zhejiang, China. I risultati mostrarono che il LAMP è più sensibile della PCR convenzionale (13,56% e 9,32%).

Xunhui Zhuo, Bin Huang, Jiaqing Luo, Haijie Yu, Baolong Yan, Yi Yang, Aifang Du. Development and application of loop-mediated isothermal amplification assays based on ITS-1 for rapid detection of Toxoplasma gondii in pork.

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